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免疫細(xì)胞化學(xué)(IC)的原理和方法

發(fā)布時(shí)間: 2023-12-25  點(diǎn)擊次數(shù): 2022次

 免疫細(xì)胞化學(xué)是一種利用特異性抗體體檢測抗原, 并且可以在顯微鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)抗原定位的方法。在IC中經(jīng)常會(huì)使用熒光進(jìn)行檢測。

主要有兩種方法:直接法、間接法。

直接法:是直接在第一抗體上附上熒光標(biāo)記 進(jìn)行檢測(直接法)。

間接法:是熒光標(biāo)記的第二抗體與第一抗體反應(yīng)并進(jìn)行檢測。

使用直接法時(shí),通過熒光染色可以更容易的進(jìn)行多重染色。在這種情況下,我們需要找到熒光間不會(huì)相互干擾的組合。

直接法的優(yōu)點(diǎn): 1.特別是使用熒光標(biāo)記的第一抗體 時(shí),易于進(jìn)行多重染色。

2.不會(huì)出現(xiàn)第二抗體引起的非特異性染色。

3.可以縮短操作時(shí)間。

間接法的優(yōu)點(diǎn):

如果使用的第一抗體來自相同的宿主,那么可以使用相同的標(biāo)記第二抗體,且較為通用。


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